需要明確的是我們做的是哪種PCR實(shí)驗(yàn)。根據(jù)檢測(cè)方法的不同,PCR實(shí)驗(yàn)分為普通PCR法和熒光定量PCR法,前者一般是終點(diǎn)PCR跑膠法測(cè)定,所以在選擇耗材時(shí)需要關(guān)注的主要是耗材本身的導(dǎo)熱性和密封性;而后者是實(shí)時(shí)檢測(cè)熒光信號(hào),除了導(dǎo)熱性和密封性外,對(duì)透光性和避光性也有所要求。
密封性、導(dǎo)熱性、透光性、避光性等因素是需要重點(diǎn)關(guān)注的:
一、密封性
密封性越好,產(chǎn)物的揮發(fā)越少,得到的產(chǎn)物就越多同時(shí)氣溶膠的產(chǎn)生也越少,對(duì)于下一輪實(shí)驗(yàn)的污染也就越少,也就意味著假陽(yáng)性的產(chǎn)生率越低。
二、導(dǎo)熱性
導(dǎo)熱性越好越均一,PCR的速度就越快,準(zhǔn)確度也越高。
三、透光性
這主要是對(duì)于熒光定量而言,耗材本身的透光性直接關(guān)系到檢測(cè)到的熒光信號(hào)多少,如果選擇耗材透光性不足,本該檢測(cè)到的信號(hào)檢測(cè)不到,那就會(huì)造成對(duì)結(jié)果的誤判。
四、避光性
這也是針對(duì)熒光定量而言的,同上面的因素,如果在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中沒(méi)注意避光,帶有熒光的試劑過(guò)度被消耗,那就會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的擴(kuò)增效率,導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果產(chǎn)生。
注:以上僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢技術(shù)老師。
密封性、導(dǎo)熱性、透光性、避光性等因素是需要重點(diǎn)關(guān)注的:
一、密封性
密封性越好,產(chǎn)物的揮發(fā)越少,得到的產(chǎn)物就越多同時(shí)氣溶膠的產(chǎn)生也越少,對(duì)于下一輪實(shí)驗(yàn)的污染也就越少,也就意味著假陽(yáng)性的產(chǎn)生率越低。
二、導(dǎo)熱性
導(dǎo)熱性越好越均一,PCR的速度就越快,準(zhǔn)確度也越高。
三、透光性
這主要是對(duì)于熒光定量而言,耗材本身的透光性直接關(guān)系到檢測(cè)到的熒光信號(hào)多少,如果選擇耗材透光性不足,本該檢測(cè)到的信號(hào)檢測(cè)不到,那就會(huì)造成對(duì)結(jié)果的誤判。
四、避光性
這也是針對(duì)熒光定量而言的,同上面的因素,如果在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中沒(méi)注意避光,帶有熒光的試劑過(guò)度被消耗,那就會(huì)影響實(shí)驗(yàn)的擴(kuò)增效率,導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果產(chǎn)生。
注:以上僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說(shuō)明或咨詢技術(shù)老師。
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